臺(tái)盼藍(lán)染色液(1%)的使用說(shuō)明

產(chǎn)品名稱(chēng)： 臺(tái)盼藍(lán)染色液(1%)

產(chǎn)品規(guī)格： 50mL/100mL

產(chǎn)品保存： 10~30℃，避光，12個(gè)月

產(chǎn)品組成：

一、 產(chǎn)品簡(jiǎn)介

臺(tái)盼藍(lán)又稱(chēng)錐藍(lán)或錐蟲(chóng)藍(lán)等，是一種陰離子型染料，常用于檢測(cè)細(xì)胞活率。臺(tái)盼藍(lán)不能透過(guò)活細(xì)胞完整的細(xì)胞膜，故活細(xì)胞不著色，而死亡細(xì)胞的細(xì)胞膜通透性增加，可使染料通過(guò)細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，使死細(xì)胞著色呈藍(lán)色。通常認(rèn)為細(xì)胞膜完整性喪失，即可認(rèn)為細(xì)胞已經(jīng)死亡。因此，借助臺(tái)盼藍(lán)染色可以非常簡(jiǎn)便、快速地區(qū)分活細(xì)胞和死細(xì)胞。

臺(tái)盼藍(lán)染色液(0.4%)常用于檢測(cè)細(xì)胞膜的完整性以及細(xì)胞是否存活?；罴?xì)胞不會(huì)被染成藍(lán)色，而死細(xì)胞會(huì)被染成淡藍(lán)色。臺(tái)盼藍(lán)可被巨噬細(xì)胞吞噬，故也可用于巨噬細(xì)胞的活體染色劑。臺(tái)盼藍(lán)染色后，通過(guò)顯微鏡下直接計(jì)數(shù)或顯微鏡下拍照后計(jì)數(shù)，就可以對(duì)細(xì)胞存活率進(jìn)行比較精確的定量，0.4%為最-常用的濃度。

二、 使用方法 

1、收集細(xì)胞：

如果收集貼壁細(xì)胞，應(yīng)用胰蛋白酶-EDTA溶液消化細(xì)胞，收集細(xì)胞。如果收集懸浮細(xì)胞，則可以直接收集細(xì)胞。收集好的細(xì)胞在1000rpm離心5min，棄上清，用1ml PBS重新懸浮細(xì)胞沉淀。

2、臺(tái)盼藍(lán)染色：

向細(xì)胞懸液中加入臺(tái)盼藍(lán)染色液(0.4%)輕輕混勻，臺(tái)盼藍(lán)終濃度為0.04%，室溫染色3min(染色時(shí)間可適當(dāng)延長(zhǎng)，但不宜超過(guò)10min)。

3、細(xì)胞計(jì)數(shù)：

吸取少量經(jīng)過(guò)染色后的細(xì)胞，用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)，鏡下可觀察到死細(xì)胞著藍(lán)色并膨大無(wú)光澤，活細(xì)胞不著色，維持正常形態(tài)有光澤。

通常如果要比較精確地進(jìn)行定量，每個(gè)細(xì)胞樣品至少需要數(shù)500個(gè)細(xì)胞，數(shù)出藍(lán)色細(xì)胞和細(xì)胞總數(shù)。細(xì)胞存活率計(jì)算公式如下：

細(xì)胞存活率＝(細(xì)胞總數(shù)－藍(lán)色細(xì)胞數(shù))/細(xì)胞總數(shù)×100%。

三、 染色結(jié)果

四、 注意事項(xiàng)

1. 注意凋亡小體偶爾也有臺(tái)盼藍(lán)拒染現(xiàn)象。

2. 產(chǎn)品僅供科研實(shí)驗(yàn)使用，請(qǐng)勿用于食品、化妝品、臨床醫(yī)療等其它用途。在使用操作中需按臨床標(biāo)本處理，并采取相應(yīng)保護(hù)措施。

3. 使用時(shí)，請(qǐng)穿戴好實(shí)驗(yàn)服、防護(hù)面罩、實(shí)驗(yàn)手套等，做好實(shí)驗(yàn)防護(hù)，避免直接接觸。

4. 剩余產(chǎn)品請(qǐng)勿隨意丟棄，請(qǐng)按照相關(guān)化學(xué)廢棄物的處理規(guī)定，進(jìn)行處理。

5. 本品含有防腐劑，攝入有害，嚴(yán)禁入口。

6. 請(qǐng)?jiān)诋a(chǎn)品有效期限前使用。